ECブルーは1999年の日本水道協会水質試験方法等調査専門委員会で評価を受け、「ピルビン酸添加XGal-MUG培地（日水製薬）」として、上水試験方法2001年版に収載されているオリジナルの培地です。 改訂水質基準（厚生労働省令第101号・厚生労働省告示第261号）の大腸菌検出用特定酵素基質培地にピルビン酸添加XGal-MUG培地として収載されました。 　特徴  １ 高感度・迅速 ピルビン酸など大腸菌群の生育を早めるための成分が含まれていますので、1CFU/100mLの大腸菌および大腸菌群を24時間以内に検出できます。また、塩素処理による損傷菌の検出にも有効です。  ２ 大腸菌と大腸菌群を 同時に検出 ２種の酵素基質(MUGとXGal）により、大腸菌と大腸菌群を１つの培地で同時に検出できます。  ３ 培地調製・滅菌不要 簡単操作 培地を分包容器または培養ボトルに充填後、容器ごと電子線滅菌しています。このため、培地の秤量や滅菌などの操作は不要で、検水を加えて培養するだけの簡単操作です。  ４ ３種類の分包形態 使用目的にあわせて、３種類の形態（100mL定性試験用分包滅菌培地、100mL定性試験用ボトル入り滅菌培地、10mL定量（MPN）試験用ボトル入り滅菌培地）から選択できます。  ５ 明瞭判定 大腸菌が陽性の場合は、紫外線照射下で淡青色〜青紫色の蛍光を発します。大腸菌群が陽性の場合、青色〜青緑色の明瞭な呈色反応を示します。 　検出原理　　特定酵素基質培地法（ピルビン酸添加XGal-MUG培地） 大腸菌の有する酵素β-グルクロニダーゼにより、合成蛍光酵素基質(MUG)が特異的に分解され、蛍光色素（4-メチルウンベリフェロン）が遊離し、紫外線照射下で淡青〜青紫色の蛍光を発します。 β-グルクロニダーゼ ＋H 2O ＋ 4-メチルウンベリフェリル-β-D-グルクロニド (MUG) (無蛍光) β-D-グルクロン酸 4-メチルウンベリフェロン(4-MU) (淡青〜青紫色の蛍光) 大腸菌群がもつ酵素β-ガラクトシダーゼにより、合成発色酵素基質（XGal）が分解され、 ブロモクロロインジゴを生じ、培地が青〜青緑色を呈します。 β-ガラクトシダーゼ ＋H 2O ＋O2 5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル-β-D-ガラクトピラノシド (XGal) (無色) 5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリン 5,5-ジブロム-4,4-ジクロロインジゴ (青〜青緑色) 　培地組成 （1L分＝17.4g中） ペプトン 5.0g 硝酸カリウム 1.0g 塩化ナトリウム 5.0g ラウリル硫酸ナトリウム 0.1g ピルビン酸ナトリウム 1.0g イソプロピル-β-D(-)-チオガラクトピラノシド(IPTG) 0.1g リン酸二水素カリウム 1.0g 5-ブロモ-4-クロロ-3-インドリル-β-D-ガラクトピラノシド(XGal) 0.1g リン酸水素二カリウム 4.0g 4-メチルウンベリフェリル-β-D-グルクロニド(MUG) 0.1g pH7.1±0.2 　分包形態 100mL定性試験用 10mL定量（MPN）試験用 ECブルー100P * （分包滅菌顆粒培地） 滅菌培養容器に分取した検水100mLに、分包培地を加えるだけの簡単操作。培地を汚染させずに添加できるスナップパックです。 ECブルー100 ** （ボトル入り滅菌顆粒培地） 培地入り培養ボトルに検水100mLを加えるだけの簡単操作。培養容器等の準備は不要です。 ECブルー10 ** （ボトル入り滅菌顆粒培地） 培地入り培養ボトルに希釈系列を組んだ検水10mLを加えるだけの簡単操作。滅菌培養ボトルの準備は不要です。 　  * 滅菌培養容器はお客様にてご用意下さい。 　** 滅菌培養容器の準備は不要です。培養容器には、透湿性にすぐれた、自蛍光を持たない素材を使用しています。 　判定方法 366nmの紫外線を照射し、淡青〜青紫色の蛍光が確認された場合、大腸菌陽性と判定します。 β-グルクロニダーゼは、大腸菌の約95%が保有しています。このβ-グルクロニダーゼにより、蛍光基質MUGが加水分解され、紫外線照射下で、淡青〜青紫色の蛍光を発します。 　 自然光下で青〜青緑色の呈色が 確認された場合、大腸菌群陽性と判定します。 本培地で発育するβ-ガラクトシダーゼ保有菌は、主に大腸菌群です。このβ-ガラクトシダーゼにより、発色基質XGalは加水分解され、青〜青緑色に呈色します。 注：２枚の写真は同じ培養ボトルを、紫外線照射下および自然光下で 　  撮影したものです。 　操作手順  [ 使用上および判定上の注意事項 ] 1) 腸管出血性大腸菌O157：H7は、β-グルクロニダーゼを産生しないため、本培地で大腸菌としての検出は できません。このため、大腸菌O157：H7は、他の方法で確認する事が必要です。 2) 呈色反応は青〜青緑系のほか、緑色、黄緑色を呈する場合がありますが、すべて陽性と判定します。 3) 呈色の程度が微妙で判定に迷う場合、次のことを実施して下さい。 1. ECブルー比色液と比較して判定します。 2. 判定試験管のバックに白い紙をあてると判定しやすくなります。 3. 大気中の酸素に触れると呈色が強くなる傾向がありますので、ミキサー等で攪拌するか転倒混和して下さい。 4. 呈色が不均一な場合、培地の濁りで判定しづらい場合は、容器の底や上部に呈色物があるかどうかを確認 して下さい。 呈色物が少しでも認められた場合は、陽性として下さい。 4) お客様が用意された容器を用いる場合は、ECブルー比色液を同じ容器に移し替えて判定して下さい。 5) 井戸水や河川水など従属栄養細菌が多く存在するような検水では培地に濁りを形成する場合があり、また、 硬度の高い検水では、白濁することがありますが、判定に支障はありません。 6) 微生物の取扱いは常に感染の危険がありますので、本製品の取扱いにあたっては熟練した人の指導のもとに、 バイオハザード対策を実施した上で使用して下さい。 7) 使用後の培地・容器・器材等はオートクレーブ等で滅菌処理した後、廃棄物に関する法令・規定に従って 処理して下さい。 　製品および関連製品 用　途 品　名 製品 コード 包　装 希望納入価 貯法・使用期限 100mL定性試験用(容器なし) ECブルー100P「ニッスイ」 05591 100mL用 ×100包 33,000円 遮光して室温に保存 ・1年間 100mL定性試験用(容器付) ECブルー100「ニッスイ」 05593 100mL用 ×80本 36,000円 遮光して室温に保存 ・1年間 10mL定量試験用(容器付) ECブルー10「ニッスイ」 05613 10mL用 ×150本 27,000円 遮光して室温に保存 ・1年間 用　途 品　名 製品 コード 包　装 希望納入価 貯法・使用期限 100mL用陽性確認用 ECブルー100「ニッスイ」比色液 05617 100mL×1本 3,500円 遮光して冷所に保存 ・1年間 10mL用陽性確認用 ECブルー10「ニッスイ」比色液 06516 10mL×1本 1,600円 遮光して冷所に保存 ・1年間 蛍光検出用 ミニ蛍光ランプ 05614 1個 5,600円 　 Copyright©日水製薬株式会社